白酒中甲醇的快速檢測(cè)方法

2024-02-16 09:46 杰凈

白酒中甲醇的快速檢測(cè)

1 范圍

本方法規(guī)定了白酒中甲醇的快速檢測(cè)方法。

本方法第一法適用于白酒（酒精度18% vol～68% vol）中甲醇的快速檢測(cè)，第二法適用于白酒（酒精度34% vol～68% vol）中甲醇的快速檢測(cè)。

第一法變色酸法

2 原理

樣品中的甲醇在磷酸溶液中，被高錳酸鉀氧化為甲醛，用偏重亞硫酸鈉除去過(guò)量的高錳酸鉀。甲醛在硫酸條件下與變色酸反應(yīng)生成藍(lán)紫色化合物。通過(guò)與甲醇對(duì)照液比較，對(duì)樣品中甲醇含量進(jìn)行判定。

3 試劑和材料

方法中所用試劑，除另有規(guī)定外，均為分析純，水為GB /T 6682規(guī)定的三級(jí)水。

3.1 試劑

3.1.1 高錳酸鉀（KMnO4）。

3.1.2 磷酸（H3PO4）。

3.1.3 偏重亞硫酸鈉（Na2S2O5）。

3.1.4 硫酸（H2SO4）。

3.1.5 變色酸鈉（C10H6Na2O8S2）。

3.1.6 乙醇（C2H6O）。

3.1.7 5%乙醇（體積分?jǐn)?shù)）：吸取乙醇5 mL，置于100 mL容量瓶，加水稀釋至刻度。

3.1.8 高錳酸鉀-磷酸溶液（30 g/L）：稱(chēng)取3.0 g高錳酸鉀，溶于100 mL磷酸-水（15+85）溶液。

3.1.9 偏重亞硫酸鈉溶液（100 g/L）：稱(chēng)取10.0 g偏重亞硫酸鈉，溶于100 mL水。

3.1.10 變色酸顯色劑：稱(chēng)取0.1 g變色酸鈉溶于25 mL水中，緩慢加入75 mL 硫酸，并用玻璃棒不斷攪拌，放冷至室溫。

3.2 參考物質(zhì)

甲醇參考物質(zhì)中文名稱(chēng)、英文名稱(chēng)、CAS登錄號(hào)、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量見(jiàn)表1，純度≥99%。

表1 甲醇中文名稱(chēng)、英文名稱(chēng)、CAS登錄號(hào)、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量

中文名稱(chēng)	英文名稱(chēng)	CAS登錄號(hào)	分子式	相對(duì)分子質(zhì)量
甲醇	Methanol	67-56-1	CH₃OH	32.04

3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 g/L）：稱(chēng)取0.1 g（精確至0.001 g）甲醇參考物質(zhì)于100 mL容量瓶中，用5%乙醇稀釋至刻度，混勻。

3.4 材料

甲醇快速檢測(cè)試劑盒：適用基質(zhì)為白酒（酒精度18～68% vol），需在陰涼、干燥、避光條件下保存。

4 儀器和設(shè)備

4.1 電子天平：感量0.001 g。

4.2 量筒：50 mL，100 mL。

4.3 移液器：1 mL，5 mL。

4.4 酒精計(jì)：分度值為1% vol。

4.5 渦旋振蕩器。

4.6 水浴鍋。

4.7 環(huán)境溫度：10℃～30℃。

5 分析步驟

5.1 待測(cè)液制備

5.1.1 酒精度的測(cè)定：取潔凈、干燥的100 mL量筒，注入100 mL樣品，靜置數(shù)分鐘，待酒中氣泡消失后，放入潔凈、擦干的酒精計(jì)，輕輕按一下，不應(yīng)接觸量筒，平衡約5 min，水平觀測(cè)，讀取與彎月面相切處的刻度示值。

5.1.2 樣品稀釋?zhuān)焊鶕?jù)酒精計(jì)示值吸取對(duì)應(yīng)體積的樣品，置于10 mL比色管中，補(bǔ)水至10 mL（參見(jiàn)表2），混勻。

表2 不同酒精度樣品吸取體積表

酒精計(jì)示值 (% vol)	樣品吸取體積 (mL)	補(bǔ)水體積 (mL)
18～22	2.5	7.5
23～27	2.0	8.0
28～32	1.7	8.3
33～36	1.5	8.5
37～41	1.3	8.7
42～45	1.2	8.8
46～53	1.0	9.0
54～60	0.9	9.1
61～68	0.8	9.2

5.1.3 顯色：吸取稀釋后的樣品溶液（5.1.2）1.0 mL，置于10 mL比色管中，加入高錳酸鉀-磷酸溶液0.5 mL，混勻，密塞，靜置15 min。加入0.3 mL偏重亞硫酸鈉溶液，混勻，使試液完全褪色。沿比色管壁緩慢加入5 mL變色酸顯色劑，密塞，混勻，置于70℃水浴中，顯色20 min后取出，迅速冷卻至室溫，即得待測(cè)液。每批測(cè)試應(yīng)吸取1 mL 5%乙醇同5.1.3“加入高錳酸鉀-磷酸溶液0.5 mL”起操作，隨行全試劑空白試驗(yàn)。

5.2 甲醇對(duì)照液制備

根據(jù)待測(cè)樣品的分類(lèi)（糧谷類(lèi)或其他類(lèi)），吸取對(duì)應(yīng)體積（參見(jiàn)表3）的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.3），置于10 mL比色管中，補(bǔ)5%乙醇至10 mL，混勻。吸取上述溶液1.0 mL，置于10 mL比色管中，同5.1.3“加入高錳酸鉀-磷酸溶液0.5 mL”起操作，制得甲醇對(duì)照液。

表3 標(biāo)準(zhǔn)溶液吸取體積表

待測(cè)樣品分類(lèi)	標(biāo)準(zhǔn)溶液吸取體積(mL)
糧谷類(lèi)	0.3
其他類(lèi)	1.0

5.3 判讀

將待測(cè)液（5.1）與甲醇對(duì)照液（5.2）進(jìn)行目視比色，10 min內(nèi)判讀結(jié)果。應(yīng)進(jìn)行平行試驗(yàn)，且兩次判讀結(jié)果應(yīng)一致。

6 結(jié)果判定要求

觀察待測(cè)液顏色，與甲醇對(duì)照液比較判讀樣品中甲醇的含量。顏色深于對(duì)照液者為陽(yáng)性，淺于對(duì)照液者為陰性。為盡量避免出現(xiàn)假陰性結(jié)果，判讀時(shí)遵循就高不就低的原則。

7 性能指標(biāo)

7.1 檢測(cè)限

0.4 g/L （以100%酒精度計(jì)）。

7.2 判定限

糧谷類(lèi)：0.6 g/L （以100%酒精度計(jì)）；其他類(lèi)：2.0 g/L （以100%酒精度計(jì)）。

7.3 靈敏度

≥95%。

7.4 特異性

≥85%。

7.5 假陰性率

≤5%。

7.6 假陽(yáng)性率

≤15%。

注：性能指標(biāo)計(jì)算方法見(jiàn)附錄A。

8 其他

本方法所述試劑及操作步驟等是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時(shí)不作限定。方法使用者在使用替代試劑或操作步驟前，須對(duì)其進(jìn)行考察，應(yīng)滿(mǎn)足本方法規(guī)定的各項(xiàng)性能指標(biāo)。

本方法的參比方法為GB 5009.266《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中甲醇的測(cè)定》。

為減少乙醇量對(duì)顯色的干擾，本方法中待測(cè)液和對(duì)照液的乙醇量為5%。

本方法中采用的高錳酸鉀-磷酸溶液（3.1.8）、變色酸顯色劑（3.1.10）久置會(huì)變色失效，建議方法使用者考察穩(wěn)定性或臨用新配。

采用本方法，酒精度為非整數(shù)的樣品，為避免出現(xiàn)假陰性結(jié)果，建議參照表2吸取酒精度整數(shù)部分對(duì)應(yīng)體積。

當(dāng)目視不能判定顏色深淺時(shí)，可采用分光光度計(jì)測(cè)定待測(cè)液與甲醇對(duì)照液570 nm處的吸光度進(jìn)行比較判定。

第二法乙酰丙酮法

9 原理

樣品中的甲醇在磷酸溶液中，被高錳酸鉀氧化為甲醛，用草酸除去過(guò)量的高錳酸鉀。甲醛在過(guò)量銨鹽條件下與乙酰丙酮反應(yīng)生成黃色化合物。通過(guò)與甲醇對(duì)照液比較，對(duì)樣品中甲醇含量進(jìn)行判定。

10 試劑和材料

方法中所用試劑，除另有規(guī)定外，均為分析純，水為GB /T 6682規(guī)定的三級(jí)水。

10.1 試劑

10.1.1 高錳酸鉀-磷酸溶液：同3.1.8。

10.1.2 草酸：無(wú)水草酸（H2C2O4）或含2分子結(jié)晶水的草酸（H2C2O4·2H2O）。

10.1.3 乙酰丙酮（C5H8O2）。

10.1.4 乙酸銨（C2H7O2N）。

10.1.5 冰乙酸（C2H4O2）。

10.1.6 50%乙醇（體積分?jǐn)?shù)）：量取乙醇（3.1.6）50 mL，置于100 mL容量瓶，加水稀釋至刻度。

10.1.7 草酸溶液（50 g/L）：稱(chēng)取5.0 g無(wú)水草酸或7.0 g含2分子結(jié)晶水的草酸，溶于100 mL水。

10.1.8 乙酰丙酮溶液：稱(chēng)取乙酸銨25.0 g，加水70 mL使溶解，加冰乙酸3 mL及乙酰丙酮0.25 mL，加水稀釋至100 mL，用力搖勻。臨用現(xiàn)配。

10.2 參考物質(zhì)

同3.2。

10.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 g/L）：稱(chēng)取0.1 g（精確至0.001g）甲醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)于100 mL容量瓶中，用50%乙醇稀釋至刻度，混勻。

10.4 材料

甲醇快速檢測(cè)試劑盒：適用基質(zhì)為白酒（酒精度34% vol～68% vol），需在陰涼、干燥、避光條件下保存。

11 儀器和設(shè)備

同4。

12 分析步驟

12.1 待測(cè)液制備

12.1.1 酒精度的測(cè)定：同5.1.1。

12.1.2 顯色：根據(jù)酒精計(jì)示值吸取對(duì)應(yīng)體積的樣品，置于10 mL比色管中，補(bǔ)乙醇和水至2.0 mL（參見(jiàn)表4），混勻。加入高錳酸鉀-磷酸溶液1.0 mL，混勻，密塞，靜置30 min。加入草酸溶液1.0 mL，混勻，密塞，置沸水浴中使其褪色，取出冷卻至室溫。加入乙酰丙酮溶液2.0 mL，混勻，密塞，置沸水浴中，顯色30 min后取出，迅速冷卻至室溫，即得待測(cè)液。每批測(cè)試應(yīng)吸取2 mL 50%乙醇同12.1.2“加入高錳酸鉀-磷酸溶液1.0 mL”起操作，隨行全試劑空白試驗(yàn)。

表4 不同酒精度樣品吸取體積表

酒精計(jì)示值 (% vol)	樣品吸取體積(mL)	補(bǔ)乙醇體積 (mL)	補(bǔ)水體積 (mL)
34～35	1.5	0.5	0.0
36～40	1.3	0.5	0.2
41～44	1.2	0.5	0.3
45～52	1.0	0.5	0.5
53～58	0.9	0.5	0.6
59～65	0.8	0.5	0.7
66～68	0.7	0.5	0.8

12.2 甲醇對(duì)照液制備

根據(jù)待測(cè)樣品的分類(lèi)（糧谷類(lèi)或其他類(lèi)），吸取對(duì)應(yīng)體積（參見(jiàn)表5）的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.3），補(bǔ)50%乙醇至2.0 mL，混勻后同12.1.2“加入高錳酸鉀-磷酸溶液1.0 mL”起操作，制得甲醇對(duì)照液。

表5 標(biāo)準(zhǔn)溶液吸取體積表

待測(cè)樣品分類(lèi)	標(biāo)準(zhǔn)溶液吸取體積(mL)
糧谷類(lèi)	0.6
其他類(lèi)	2.0

12.3 判讀

將待測(cè)液（12.1）與甲醇對(duì)照液（12.2）進(jìn)行目視比色，10 min內(nèi)判讀結(jié)果。應(yīng)進(jìn)行平行試驗(yàn)，且兩次判讀結(jié)果應(yīng)一致。

13 結(jié)果判定要求

同6。

14 性能指標(biāo)

14.1 檢測(cè)限

0.6 g/L （以100%酒精度計(jì)）。

14.2 判定限

糧谷類(lèi)：0.6 g/L （以100%酒精度計(jì)）；其他類(lèi)：2.0 g/L （以100%酒精度計(jì)）。

14.3 靈敏度

≥95%。

14.4 特異性

≥85%。

14.5 假陰性率

≤5%。

14.6 假陽(yáng)性率

≤15%。

注：性能指標(biāo)計(jì)算方法見(jiàn)附錄A。

15 其他

本方法的參比方法為GB 5009.266《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中甲醇的測(cè)定》。

為減少乙醇量對(duì)顯色的干擾，本方法中待測(cè)液和對(duì)照液的乙醇量為50%。

采用本方法，酒精度為非整數(shù)的樣品，為避免出現(xiàn)假陰性結(jié)果，建議參照表4吸取酒精度整數(shù)部分對(duì)應(yīng)體積。

當(dāng)目視不能判定顏色深淺時(shí)，可采用分光光度計(jì)測(cè)定待測(cè)液與甲醇對(duì)照液415 nm處的吸光度進(jìn)行比較判定。

附錄A

性能指標(biāo)計(jì)算表

樣品情況^a	檢測(cè)結(jié)果^b		總數(shù)
	陽(yáng)性	陰性
陽(yáng)性	N11	N12	N1.=N11+N12
陰性	N21	N22	N2.=N21+N22
總數(shù)	N.1=N11+N21	N.2=N12+N22	N=N1.+N2.或N.1+N.2
顯著性差異（c²）	c²=（\|N12-N21\|-1）²/（N12+N21），自由度（df）=1
靈敏度（p+，%）	p+=N11/N1.
特異性（p-，%）	p-=N22/N2.
假陰性率（pf-，%）	pf-=N12/N1.=100-靈敏度
假陽(yáng)性率（pf+，%）	pf+=N21/N2.=100-特異性
相對(duì)準(zhǔn)確度，%^c	（N11+N22）/(N1.+N2.)
注： 1、由參比方法檢驗(yàn)得到的結(jié)果或者樣品中實(shí)際的公議值結(jié)果。 2、由待確認(rèn)方法檢驗(yàn)得到的結(jié)果。靈敏度的計(jì)算使用確認(rèn)后的結(jié)果。 N：任何特定單元的結(jié)果數(shù)，第一個(gè)下標(biāo)指行，第二個(gè)下標(biāo)指列。例如：N11表示第一行，第一列，N1.表示所有的第一行，N.2表示所有的第二列；N12表示第一行，第二列。 3、為方法的檢測(cè)結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確性的結(jié)果，與一致性分析和濃度檢測(cè)趨勢(shì)情況綜合評(píng)價(jià)。